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標(biāo)本溶血是臨床實驗室最常見的誤差來源,是標(biāo)本拒收的主要原因。因標(biāo)本溶血發(fā)出錯誤結(jié)果報告可能造成誤診誤治,重新抽血給患者增加痛苦、報告周期延長,復(fù)查造成人力、物力、經(jīng)濟(jì)損失。
1、如何判斷溶血?
一般采用觀察離心后的標(biāo)本來判斷是否溶血,但有時離心后不小心震蕩了一下導(dǎo)致標(biāo)本有輕微的紅色渾濁,不仔細(xì)看也會當(dāng)做是溶血。那么,怎么才能確定是不是真的溶血呢?最好的辦法就是測一下血清中的血紅蛋白含量,即溶血指數(shù),就知道有沒有溶血了。
具體的如何界定樣本是否發(fā)生了臨檢相關(guān)性溶血溶血,目前比較常規(guī)的做法是根據(jù)溶血指數(shù)(haemolysisIndex,或者 HI)來判斷。溶血指數(shù)實際上就是血漿中游離的血紅蛋白的水平。有研究人員比較了 50 篇溶血的研究,發(fā)現(xiàn)使用溶血指數(shù)來界定溶血的有 20 篇, 19 篇使用目測,另外 11 篇沒有標(biāo)明方法。
使用目測溶血情況來取舍臨床樣本的做法,因為缺乏客觀定量的標(biāo)準(zhǔn),也沒有考慮不同指標(biāo)對溶血的敏感度,所以被認(rèn)為是不準(zhǔn)確的。在 2018 年的克魯?shù)蟻喌囊环菅芯恐?,人們仔?xì)跟進(jìn)了急診室里的 495 份血樣和以及檢測結(jié)果,發(fā)現(xiàn)目測判斷溶血可造成多達(dá) 31%的檢測結(jié)果不當(dāng),其中包括 20.7%的情況下,溶血對結(jié)果有影響但是被忽略了, 10.3%的情況下檢測結(jié)果被暫停發(fā)送但后來發(fā)現(xiàn)并沒有受到溶血的影響。
在采用溶血指數(shù)的研究中,溶血指數(shù)平均的界定值為 846mg/L 血紅蛋白,但是區(qū)間很大,在 150 mg/L 到 3000 mg/L 之間。區(qū)間之所以很大,和不同檢測指標(biāo)對溶血的容忍程度有關(guān)。目前在大多數(shù)生化儀器上,溶血指數(shù)已經(jīng)是一個獨(dú)立的指標(biāo)了,這樣就可以對所有上機(jī)的臨檢血液樣本進(jìn)行溶血程度的標(biāo)定,并在實踐中逐步積累溶血指數(shù)和各類臨檢指標(biāo)的關(guān)系,從而在定量的基礎(chǔ)上確定各類指標(biāo)對溶血的承受程度。
2、發(fā)生溶血的原因
發(fā)生溶血的原因,從是否和臨檢過程相關(guān)的角度看,可以分為臨檢相關(guān)性溶血,以及非臨檢相關(guān)性溶血。臨檢相關(guān)性溶血,指的是由于臨檢操作不當(dāng)而造成紅細(xì)胞破裂而發(fā)生的溶血,這是我們討論的重點。臨床實踐和相關(guān)文獻(xiàn)都證明了,溶血的發(fā)生和樣本收集過程有直接的關(guān)系,在臨檢過程中如果采血針口徑過小、抽血速度過快、采血點選擇不當(dāng)、止血帶使用過久、采血管未充滿、采血后過度混搖、運(yùn)輸過程中過度震蕩等,都會造成溶血。具體可以細(xì)分為以下:
標(biāo)本采集
采血損傷,如反復(fù)進(jìn)針、血腫部位采血;從靜脈留置針、輸液管、中心靜脈導(dǎo)管等血管通路裝置采血;注射器采血;未首選肘前正中靜脈、頭靜脈及貴要靜脈;使用細(xì)針頭;消毒劑未干;止血帶使用超過1分鐘;未及時混勻、劇烈震蕩混勻;采血量不足,未達(dá)采血管真空度量刻度;真空采血管、分離膠質(zhì)量差;使用大容量真空采血管等。
特別注意的是,美國的一項研究中,使用 853 個樣本對兩種采血路徑做了比較,這兩種路徑是靜脈真空抽血和靜脈導(dǎo)管抽血,發(fā)現(xiàn)通過靜脈導(dǎo)管抽血的溶血發(fā)生率為 5.6%,而直接用針從靜脈抽血時溶血發(fā)生率為 0.3%,通過靜脈導(dǎo)管的溶血發(fā)生率要明顯高于直接用針抽取的路徑。另一項研究中比對了另外兩項條件,就是靜脈導(dǎo)管和真空采血管結(jié)合,比對靜脈導(dǎo)管和針頭直接配合,發(fā)現(xiàn)前者的溶血發(fā)生率明顯地高。蝶翼針的使用,可以減小溶血發(fā)生率,無論是否和靜脈導(dǎo)管配合。而小口徑針頭的使用(22號針頭或者更細(xì)),能夠明顯增加溶血發(fā)生的情況。從若干臨床的比對觀察資料,我們可以看出,臨檢相關(guān)性溶血發(fā)生的主要物理學(xué)原因,是臨床檢驗的某些步驟中的剪切力過大,超出了紅細(xì)胞在體內(nèi)正常的血液流變過程中的應(yīng)力,從而造成細(xì)胞膜的破裂。正是由于這個原理,以上提到的不當(dāng)操作,比如采血針口徑過小、抽血速度過快、抽血路徑過長、運(yùn)輸過程中過度震蕩等,都會造成溶血。
標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)
氣動傳輸過程中劇烈震蕩;轉(zhuǎn)運(yùn)時間長;轉(zhuǎn)運(yùn)車溫度過高、劇烈震蕩等。
實驗室標(biāo)本處理
標(biāo)本保存時間長;標(biāo)本保存溫度過高;未及時離心;離心前血液未完全凝固;離心溫度過高、速度過快;再次離心等。
體內(nèi)溶血
自身免疫性溶血性,如血型不合輸血;遺傳、代謝病,如地中海貧血、肝豆?fàn)詈俗冃?用藥后藥物溶血反應(yīng),如靜脈注射頭孢曲松鈉致急性溶血反應(yīng);重度感染;彌散性血管內(nèi)凝血;心臟支架、人工心臟心瓣膜、體外膜肺氧合治療等。體內(nèi)溶血造成的標(biāo)本溶血實驗室不應(yīng)拒收,醫(yī)師應(yīng)在申請單上標(biāo)注說明。
另外,非臨檢相關(guān)性的溶血是病理原因造成的,有獨(dú)立的檢測指標(biāo),因為不是本文討論的重點所以就不再贅述了。
3、溶血樣本對臨檢的影響
影響檢驗結(jié)果準(zhǔn)確性的因素很多,包括分析前、分析中、分析后。分析前影響因素占很大比例,畢竟樣本來到檢驗科之前經(jīng)歷了什么,我們無法得知。所以當(dāng)我們碰到異常的結(jié)果時,應(yīng)該分別從實驗室及臨床的角度去科學(xué)分析,對于無法解釋的結(jié)果,多與臨床溝通,這樣有利于我們及時發(fā)現(xiàn)問題,并通過重新采集標(biāo)本復(fù)查等方式予以解決,從而得出更加準(zhǔn)確可靠的檢驗結(jié)果。
溶血對多項臨床檢測指標(biāo)有著不同的、定量的、顯著的影響,因此在提供臨檢樣本質(zhì)量、規(guī)避臨檢相關(guān)性溶血的同時,也需要在臨檢分析的過程中,充分考慮到溶血因素的存在和影響,積極制定指標(biāo)相關(guān)性溶血指數(shù),從而確保臨檢數(shù)據(jù)的有效性。
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